2020年2月4日 星期二

水中微生物單一樣本簡易吸取方式

水中微生物觀察,若需要觀察特定目標,會面臨標的物到處跑、水樣過厚脫離景深等等問題,獨立吸取出來後,可以將標的物的玻片做的比較薄,視需求吸出水份,可以限制標的物活動,要吸取標的物,大概有以下簡易做法。

一、器材:


1.顯微鏡:物鏡使用4倍到20倍皆可,重點在於工作距離,需要留0.5公分以上做吸取操作,若是倒立顯微鏡,則無此問題)

2.塑膠滴管:建議採用1到2ml的滴管,使用一般的3ml滴管亦可,但是太長會增加操作難度。

3.培養皿與牙線棒:培養皿可增加取樣量,牙線棒尖端用來把過厚的藻類或分開,這部分就不一定需要。

※細口滴管加工方式:
距離滴管末端約一半的位置,用打火機在下方邊加熱變旋轉,加熱寬度約0.3到0.5cm,加熱至管子變透明時,停止加熱,握著前段拉長到適當粗細,大約拉長3到5公分後停止,先不要放開,等到拉長部分冷卻固化,再放開,然後裁剪,保留約1到2公分皆可,可微微斜剪,然後標示管口斜向位置,吸取時滴管開口若未接觸水膜,會無法順利吸取。








※基本手顯用作倒立顯微鏡:將載物台轉成手機夾,手機後端用物片墊高比較不會翻倒,黑眼圈是方便找鏡頭正確位置。





二、操作步驟:以簡易倒立顯微鏡示範,若是一般商業顯微鏡,4倍與10倍物鏡有較充足的工作距離供滴管操作吸取動作。

1. 準備水樣:吸取水樣,在玻片上分成數滴,或是直接夾取部分藻類,然後儘量攤開,此部分可用牙線棒尖端部份協助,但不要拖拉輾壓,避免水微被壓爆,水樣儘量分散到能微微看見底部玻片,太厚會造成觀察困難。

2. 尋找標的:初步尋找目標物,概略吸取,此步驟可以用傳統滴管先吸多一些,也可以直接用自己加工的細口滴管直接吸取,倒立顯微鏡對著鏡頭上的玻片吸取即可,若是商業用顯微鏡,請先縮光圈縮窄目標範圍,大小光圈造成差異如下照片比較,對著亮區中央吸取即可,吸取後,確認標的物被吸走,進行下一步驟。



3. 純化標的:將初步吸得水樣,分成數滴放在新的載玻片上,然後確認標的物在哪一滴,繼續吸取目標,逐步純化。







吸取所需目標水微後,後續操作大概要留意不要讓蓋玻片把水微壓爆;目標單一,可以考慮用四分之一蓋玻片,會比較好找。



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